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【水產應用】抗菌肽對黃鱔生長和免疫能力的影響評價
新聞來源:【管理員】    發布時間:2019-03-27   瀏覽次數:200

本文由長江大學水生經濟動物研究中心&深圳市圣西馬生物技術有限公司 原創

為探討深圳市圣西馬生物技術有限公司生產的抗菌肽對黃鱔生長及免疫能力的影響,長江大學水生經濟動物研究中心受深圳市圣西馬生物技術有限公司的委托,于2018年進行相關試驗,試驗方法與結果如下:

 

  1.1 試驗材料與養殖管理  

抗菌肽由深圳市圣西馬生物技術有限公司提供。用于本試驗的黃鱔全部來自于長江大學黃鱔養殖試驗基地人工繁育的個體,選擇健康、體重相近個體放置于池塘網箱中進行試驗。試驗設一個對照組與4個試驗組,試驗黃鱔平均體重30±5g/尾,每個處理3個重復,每個重復60尾置于同一網箱。各試驗組投喂的餌料的組成見表1。

 


在同一池塘里,將試驗黃鱔分別飼養在條件相同的網箱中(x寬為2mx 2m)。每天下午18:00投喂一次,日投餌量占黃鱔體重7%~11%。試驗從2018720日開始至928日為止,為期68天。試驗期間,定期檢測水質,記錄攝食量,并清除殘餌。采樣在試驗結束后24小時不再投喂飼料后進行。

 

1試驗分組及餌料組成

 

 

  1.2 指標測定方法  

1.2.1 生長性能指標測定

養殖試驗結束后測定各試驗組黃鱔的終末體重,計算成活率、相對增重率、飼料系數。相對增重率= (末重/g-初重/g) +[初重/g]x100%,飼料系數= (投飼量/g) + (增重量/g)


1.2.2 生化指標和免疫指標的測定

1.2.2.1 樣品采集

每組隨機選取12尾黃鱔,每2尾合并為一個樣。先用酒精75%在黃鱔采血部及腹部擦拭,然后在尾部泄殖腔處用無菌注射器傾斜45°采血。血液在室溫靜置后,4'C冷藏過夜,次日4000r/min離心,吸取上清夜,-80℃保存。

 

1.2.2.2生化指標和免疫指標的測定

本試驗共檢測血清中8個生化、免疫指標,分別為:總蛋白(total protein TP)、甘油三酯(triglycerides, TG)、 谷丙轉氨酶( glutamate pyruvic transaminase,GPT)、超氧化物歧化酶( superoxide dismutase,  SOD)、過氧化氫酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidase, GSH-Px )、酸性磷酸酶( acidphosphatase, ACP)、 堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, AKP), 采用南京建成生物工程研究所試劑盒進行測定。

 

  1.3 攻毒成活率的測定  

飼養試驗結束后,分別從每個分組選取尾體重相近的40尾黃鱔,設3個重復,每個重復20尾魚,分別飼養在預先編號的60L體積的塑料桶中。經過7天的適應期后,分別用一次性注射器腹腔注射嗜水氣單胞菌(A.hydrophila) 菌液0.4ml/尾(嗜水氣單胞菌菌種來源于華中農業大學水產試驗室,注射嗜水氣單胞菌菌液濃度為1x 109CFU/ml)。在注射完成后,每間隔兩個小時觀察一次魚的游動、死亡情況,持續7天后統計死亡尾數和死亡時間,計算攻毒后成活率(SR)和免疫保護力(RPS)。


 

  1.4 數據統計與分析  

試驗數據用SPSS20.0軟件包中的單因素方差分析(One-way ANOVA)和Duncan氏多重比較,檢驗各組的差異,不同的小寫字母表示各組間差異顯著(P<0.05)。所有結果均已平均值標準誤( mean±SEM)表示。

 

 

  2.1 抗菌肽對黃鱔生長及成活率的影響  

從表2可知,餌料中添加抗菌肽時能有效促進黃鱔的生長,降低飼料系數,提高成活率。當餌料中添加的抗菌肽量為600mg/kg時,顯著促進黃鱔生長(P<0.05),降低飼料系數(P<0.05), 提高養殖成活率(P<0.05)但隨著其添加量的提高,這變化趨勢存在,但不存在顯著性差異。


抗菌肽對黃鱔生長及成活率的影響

注:表中數據為平均數±標準差(n=6), 同一列數據肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

 

 

  2.2 抗菌肽對黃鱔血清生化指標的影響  

從表3可知,餌料中添加抗菌肽時能顯著提高黃鱔血清中的TP水平(P<0.05),且當餌料中添加的抗菌肽量為600mg/kg時TP含量最高,與對照組相比顯著提高了15.99% (P<0.05);餌料中添加抗菌肽時能顯著提高黃鱔血清中的TG水平(P<0.05),且當餌料中添加的抗菌肽600mg/kg時TG含量最低,與對照組相比顯著降低了32.10% (P<0.05)。添加抗菌肽的各組血清谷丙轉氨酶活性有一定程度的提高,當餌料中添加的抗菌肽800mgkg時,與對照組間的活性差異顯著(P<0.05)。


表3 抗菌肽對黃鱔血清生化指標影響

注:表中數據為平均數±標準差(n=6),同一列數據肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

 

  2.3 抗菌肽對黃鱔血清磷酸酶的影響  

從表4可知,抗菌肽能顯著提高黃鱔血清磷酸酶的活性。當添加比例為800mg/kg時堿性磷酸酶(AKP)活性最大,與對照組相比顯著提高了39.36%。當添加600mg/kg時酸性磷酸酶(ACP) 活性最大,與對照組相比顯著提高了65.47%,當添加為800mg/kg時活性有所下降。


表4 抗菌肽對黃鱔血清磷酸酶活性的影響

 

注:表中數據為平均數±標準差(n=6),同一列數據肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。


  2.4 抗菌肽對黃鱔血清氧化酶的影響  

從表5可知,抗菌肽對黃鱔血清超氧化物歧化酶(SOD) 、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px) 、過氧化氫酶(CAT)有顯著影響(P<0.05)。這三種酶均在餌料中抗菌肽600mg/kg時活性最大,與對照組相比SOD顯著提高了25.36%(P<0.05),GSH-Px 顯著提高了22.10% (P<0.05) ,CAT顯著提高了34.66% (P<0.05)。當添加比例進一步加大時,氧化酶活性有所下降。


表5 抗菌肽對黃鱔血清抗氧化酶活性的影響

 

注:表中數據為平均數±標準差(n=6),同一列數據肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。


 

  2.5 抗菌肽對活菌攻毒后黃鱔存活率的影響  

經嗜水氣單胞菌感染后,死亡的黃鱔病理變化主要表現為肝臟、腎臟等實質性器官充血、出血,及廣泛的組織細胞變性和壞死等癥狀。由表6可知,投喂抗菌肽能夠提高黃鱔感染嗜水氣單胞菌后的成活率,且在投喂量為800mg/kg時成活率最高,與對照組相比成活率顯著提高了15% (P<0.05),免疫保護力為85.71%。


表6 攻毒試驗結果

注: 同一列數據肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

 

 

綜上所述:通過對抗菌肽對黃鱔生長及免疫能力影響的研究結果看,抗菌肽添加在飼料中投喂黃鱔,能有效促進黃鱔的生長,提高黃鱔的免疫能力,在飼料中添加量以每公斤飼料600mg/kg為最適。


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